二、采用SP过氧化物酶标记的链酶卵白素，迈新公司产品鼠抗人PCNA、p53单抗 及兔抗人nm23，PBS液代替一抗作阴性对照，阳性对照片由公司提供。

　　三、阳性细胞记数和统计处理

　　1．细胞增殖活性PCNA的阳性率：PCNA为定位于细胞核颗粒性阳性，用高倍镜视野随机选择肿瘤区进行记数，计算每1000个肿瘤细胞中阳性细胞数所占比例，每例至少记数5000个肿瘤细胞（阳性肿瘤细胞数／5000×100％）。本组阳性表达从9.2％～73.2％不等，根据Morin计算方法，以平均阳性率细胞36.2％为标准，低于36.2％者定为低标，反之为高标［3］。

　　2．p53阳性指标：定位于癌细胞核呈棕黄颗粒状或团块状，阳性细胞＞10％时定为阳性［4］，否则定为阴性。

　　3．nm23的指标：nm23棕色颗粒分布在粘膜上皮及癌细胞胞浆内，部分膜着色，癌细胞阳性率＞30％者为阳性，癌细胞阳性率＜30％者为阴性。

　　4．结果应用卡方检验。

　　结果

　　一、PCNA　表达阳性的细胞可以存在于正常大肠粘膜、癌旁及癌细胞核内，本组表达见表1。77例大肠癌PCNA高低标者38例占总病例49.3％。PCNA的高标表达与肿块大小、浸润程度、分化程度、Duke′s分期、淋巴结转移呈正相关，有统计学意义。

　　二、p53　表达阳性仅存在于肿瘤细胞核内，本组阳性者42例，占54.5％见表1。阳性表达与Duke′s分期及淋巴结转移、分化程度正相关。

　　三、nm23　表达阳性位于浆内，部分膜着色，阳性者50例，占64.9％，见表1。仅与淋巴结转移呈负相关。

　　四、PCNA与p53蛋白表达两者正相关，42例p53阳性表达中PCNA高标者25例，占59.5％；36例p53阴性中PCNA高标者14例，占40％，P＜0.05，有显著性差异。

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