3　讨论

　　P16是美国分子遗传学家于1994年分离的一种新的肿瘤抑制基因〔1〕，因其对多种肿瘤起抑制作用，故称为多种肿瘤抑制基因1（MTS1）。P16位于人染色体9P21区位，全长8.5kb，其完整编码序列包括2个内因子和3个外显子。研究发现，P16基因在众多人类肿瘤中存在相当频繁的突变率和复杂多样的突变形式。据统计，75％的癌细胞株中有P16基因缺失和突变，超过P53基因50％的突变率〔2、3〕。

　　目前，已在哺乳动物细胞中分离出8类主要的周期素，连同亚类共11种，Cyclin　D1癌基因是其中之一。Cyclin　D1位于人染色体11q13区位，长度为120kb，由295个氨基酸构成，分子量为34000，是一类在细胞周期中含量呈周期性变化的细胞周期调节蛋白，它在G1期含量最高、活性最大〔4〕。

　　真核细胞的分裂必须经过两个关键环节，即G1→S期和G2→M期，周期素依赖激酶（CDKs）是细胞周期调节的中心，目前发现至少有5种CDK与G1→S期的调节有关，CDK4最为关键。CDK4本身无活性，当它与相应的细胞周期蛋白Cyclin　D1结合后被激活，形成CDK4-Cyclin　D1复合物磷酸化PRb（为视网膜母细胞瘤基因蛋白），同时释放转录因子E2F，E2F可促进DNA的复制和细胞分化，使细胞从G1期进入S期。磷酸化PRb活化P16的转录，当P16表达增加时，P16即与CDK4结合，破坏CDK4-Cyclin　D1的酶活性，使PRb磷酸化作用减小。如果解除P16的抑制作用，PRb持续磷酸化，则可导致细胞过度增生，使G1期未充分发育的细胞提前进入S期，这可能是肿瘤发生的主要原因之一。

　　本研究表明，P16和Cyclin　D1与大肠癌有以下关系：①P16的表达缺失与Cyclin　D1的表达均可发生在正常大肠组织、息肉组织和癌组织中，但其在癌组织中的表达率及强度远高于正常大肠组织和息肉组织；特别是在腺瘤样息肉组织中P16表达缺失有上升趋势，同时伴有Cyclin　D1的表达。提示该组因子的变化可能发生在癌变的早期阶段，证明P16表达缺失和Cyclin　D1的过度表达与大肠癌的发生有密切关系〔5～7〕。②与大肠癌组织分化程度的关系：P16在高中分化腺癌和低分化腺癌中的表达率均超过30％，而在粘液腺癌中无阳性表达，未分化癌阳性表达不到10％，两组比较有明显差异。提示P16在大肠癌组织中的阳性表达率与肿瘤恶性程度呈负相关，其缺失可能与大肠癌分化不良有关。另外，Cyclin　D1在大肠癌各组织间的阳性表达无差异性。③与大肠癌患者预后的关系：大肠癌有淋巴结转移者P16大多数表达缺失，而Cyclin　D1多呈阳性表达。术后2年未死亡者P16阳性表达率明显高于复发死亡者（P＜0.01），提示P16可作为估计大肠癌患者预后的参考指标。Cyclin　D1在有淋巴结转移者中的阳性表达明显高于无淋巴结转移者（P＜0.01），虽然Cyclin　D1在死亡与生存者中无统计学意义，但其阳性表达百分率有较明显差异，能否作为判断大肠癌患者的预后指标有待进一步考证。

　　4　参考文献

　　1，Kamb A，Gruis NA，Weaver feldhaus J，et al.A cell cyce regulator potentially involved in genesis of many tumor types.Science，1994，264（12）：436～440.

　　2，Marx J.New tumor Suppressor may rival P53.Science，1994，264（15）：344～345.

　　3，吕肖勇，多基因变异与胃粘膜细胞癌变的关系.中华消化杂志，1996，16（1）：9～13.

　　4，Donnellan R，Chetty R.Cyclin D1 and human neoplasia.J Clin Pathol：Molpart，1998，51：1～7.

　　5，游学科，卢放根.结肠癌组织中P16和CDK4的表达与相互关系.湖南医药，1997，14（14）：195～196.

　　6，Maeda K，Chung YS，Kang SM，et al.Overexpression of Cyclin D1 and P53 associated with disease recurrence in multistage colorectal adenocarcinoma.Int J Cancer，1997，310～315.

　　7，Arber N，Doki Y，Han EK，et al.Antisense to Cyclin D1 inhibits the growth and tumor-genicity of human colon cancer cells.Cancer Res，1997，57：1569～1574.

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