| 2.1 不同培养方法的HIV分离情况 4名受检者中有3例全血标本均分离出HIV-1。有1例阳性标本不管是常规培养还是全血培养均未分离成功。在常规培养中,已出现AIDS症状的病人的血样标本在共培养第3天时已出现阳性,第7天时P24抗原测量值已超过3.0,而其他未出现症状的HIV携带者血样标本在共培养第7天时才出现阳性,且其OD值明显低于AIDS病人。但是这种现象在微量全血培养中未能观察到,AIDS病人和HIV携带者血样标本在共培养第7天时几乎同时出现阳性,且OD值无明显差异。全血培养中,方法1与方法2血样培养首次出现阳性的时间没有明显差异,但是方法2中同一时间内不含PHA-P培养分离出的病毒滴度均比含PHA-P的稍高些。
2.2 全血培养中HIV复制的动力学 微量全血培养中出现阳性的时间顺序是10 μl>62.5 μl>125 μl>250 μl>500 μl>1000 μl。在培养第7天时,10 μl孔、62.5 μl孔、125 μl孔均出现阳性,但P24抗原测量值有差异,其中10 μl孔>62.5 μl孔>125 μl孔。随着培养时间的增加,其它孔也相应陆续出现阳性,直到第21天,1000 μl孔才出现阳性,且滴度很低。每孔滴度随培养时间的延长而递增。
3 讨论
HIV分离培养是当今HIV垂直感染诊断的依据,早期虽然已有常规培养方法来检测HIV,但这些技术依赖于血液成份的分离,花时间并难以从儿童得到有效血量。血清学检测在<24月龄的小儿中有一定的局限性,其主要原因是因为24个月内的婴儿体内可能仍存有母体的HIV抗体,而ELISA和WB的方法不能确定抗HIV抗体是来源于母亲还是婴儿自身产生。为此,Bayliss等人首次用微量全血培养法从HIV/AIDS感染者血液中分离出HIV病毒。此外,国外其他学者在微量血培养方面也做了不同程度的研究。微量全血培养的优点在于省去分离PBMC的需要,以及培养能很快地建立,且只要少量体积的全血,这些特征使它真正地适合于小儿艾滋病感染诊断及管理。
HIV分离率除了与实验方法有关外,还与临床症状、病毒学、免疫学等方面有关。外周血中CD4+和CD8+淋巴细胞数对HIV的分离率有一定的影响,而与是否接受抗病毒治疗无关。本实验中有一株未能分离出HIV,可能与 上一页 [1] [2] [3] [4] 下一页 2005-8-29 16:24:19文章来自中健网13407疾病频道2005-8-29 16:24:19 作者:佚名
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