| identified by five McAbs
2.2.3 "夹心"ELISA法的建立及初步应用 我们应用2株识别不同表位的McAb建立了检测HIV p24抗原的夹心ELISA法, 检测下限可达1 μg/L左右(图3)。 检测的24份HIV抗体阳性血清中, 无一份p24抗原呈阳性。
3 讨 论
3.1 p24抗原检测的应用前景 HIV-1感染机体后, 感染者血液中最早出现的是病毒gag基因表达产物p24抗原, 然后才出现相应的特异性抗HIV抗体, 以后随抗体滴度的升高p24抗原含量呈逐渐下降的趋势, 以至检测不出。 在病情发展后期, 病毒大量复制, 机体免疫力下降, 所产生的抗体不足以中和病毒抗原时, p24抗原在血中又可测出［４］。 尤其值得注意的是HIV阳性母亲所生育的婴儿30%可能已受到感染,但由于婴儿体内母源性抗HIV抗体可持续13月~21月之久［5, 6］,常规检测抗HIV抗体不适用于婴儿,而p24抗原的检测则可弥补这一不足。
图3 夹心ELISA法检测HIV p24的标准曲线
Fig 3 Standard curve of the sandwich ELISA for detection of HIV p24
p24抗原的测定主要应用于HIV感染早期, 可缩短病毒感染至测出的窗口期至12 d~15 d［７］。 除此以外, 其还可用于监测AIDS病情发展, 预后判断以及评价抗HIV药物的疗效等方面［８］。
3.2 存在问题与展望 由于p24抗原在HIV感染者血清中含量很低(一般在0~500 ng/L左右, 极少数可达到mg水平［９］)和抗原-抗体复合物的形成也可影响其测定, 因此检测中所面临的最大问题是, 方法的敏感性高低能否满足检测的需要。 国外在这方面已进行了很多研究, 美国FDA已规定, 自1995年8月起, 所有全血、 成份血、 白细胞和原料血浆的献血员, 在献血前必须进行HIV-1抗原的筛选。 当前国内还没有国产的HIV p24检测试剂盒供应, 所需产品均需进口, 但因价格昂贵限制了其应用。
本研究制备了5株抗HIV p24的McAb, 利用2株识别不同表位McAb建立了检测p24抗原的夹心EL 上一页 [1] [2] [3] [4] [5] [6] 下一页 2005-8-29 16:16:07文章来自中健网13404疾病频道2005-8-29 16:16:07
作者：佚名
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